ПЦР на ВИЧ, для чего нужен этот анализ

ПЦР на ВИЧ — один из самых информативных молекулярно‑генетических методов. С его помощью обнаруживают как инфекции, так и наследственные заболевания. Этот же подход применяют для поиска в образце материала частиц ВИЧ — хронической инфекции, которая без лечения прогрессирует всю жизнь. В клинической практике ПЦР входит в число рекомендуемых исследований, обычно выполняется на платной основе при подозрении на вирус иммунодефицита человека. Важно помнить: на самых ранних сроках достоверность результата достигает примерно 80 из 100 случаев и повышается по мере увеличения срока после заражения.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР‑диагностика на ВИЧ расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Для такого анализа используют разные типы биоматериала. Чаще всего исследуют венозную кровь; по отдельным показаниям могут изучаться влагалищные выделения у женщин или семенная жидкость у мужчин.

Внимание! Слюна для ПЦР при диагностике ВИЧ не применяется: в ней чрезвычайно мало вирусного материала. То же относится к моче, поту и слезам.

Чаще всего показанием к проведению этого исследования служит дважды положительный ИФА (иммуноферментный анализ) и необходимость уточнения статуса. Об альтернативных назначениях речь пойдет позже.

Подробно о сути анализа

В основе анализа на ВИЧ методом ПЦР лежит многократное копирование фрагментов нуклеиновых кислот с помощью специальных ферментов. Живые клетки и вирусы несут генетическую информацию в виде РНК и ДНК — молекул, хранящих и передающих генетический код.
При низкой концентрации вирусных частиц в образце ПЦР «находит» и многократно увеличивает число целевых фрагментов РНК/ДНК. Благодаря этому удается выявить следовые количества генетического материала вируса. Именно поэтому ПЦР способна давать результат уже через несколько недель после возможного инфицирования ВИЧ.

Наиболее надежные результаты получают при исследовании венозной крови (плазмы). В лаборатории из пробы выделяют нуклеиновые кислоты, затем проводят этапы обратной транскрипции (для РНК‑вируса ВИЧ) и амплификации. Реактивы «прилипают» к целевым участкам вирусного генома и многократно их копируют. Количество копий растет по цепному, экспоненциальному принципу, пока присутствие самого вируса (а не антител к нему) не станет измеримым. По такому принципу не работают серологические тесты — это ключевое отличие ПЦР.

Компоненты реакции

Метод ПЦР позволяет заранее, на ранних этапах, заподозрить развитие вируса в организме. Почему же он не используется повсеместно в рамках бесплатной медицины? Потому что это технологически сложный и затратный тест, требующий следующего набора компонентов:

• матрица нуклеиновой кислоты с участком ДНК/РНК, предназначенным для амплификации;
• два праймера (по одному для каждой цепи целевого участка);
• фермент полимераза, обеспечивающий синтез новых цепей;
• дезоксирибонуклеозидтрифосфаты (строительный материал для копий);
• ионы двувалентного магния;
• специальный буфер — раствор с оптимальной кислотностью, солевой концентрацией и содержанием магния.

Внимание! Чтобы защитить образец от перегрева и испарения, в классической ПЦР использовали слой минерального масла (парафинового), обладающего высокой температурой кипения.

Высокая точность метода объясняется его чувствительностью. Но именно она повышает риск ложноположительных результатов при нарушении техники или контаминации образца посторонним материалом.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Для объективной оценки метода в таблице ниже приведем ряд преимуществ и недостатков исследования:

Преимуществ у методики больше. Если оценивать диагностику с точки зрения своевременного начала терапии и продления жизни пациента, ПЦР помогает быстрее принять верные решения.

Особенности анализа

Главная особенность этого анализа — возможность ранней диагностики ВИЧ, с чем другие методы справляются хуже. Через сколько дней после предполагаемого инфицирования можно сдавать кровь на ПЦР? Обычно этот промежуток составляет 10–14 дней. Как правило, результат готов в течение следующих 24 часов. Сроки могут отличаться в зависимости от загрузки и регламентов конкретной лаборатории.

Назначение исследования

ПЦР в большинстве случаев проводят для выявления ВИЧ (вируса иммунодефицита человека). Анализ также назначают при подозрении на инфекции, передающиеся половым путем, а метод в целом применяют и для диагностики ряда наследственных болезней.

ПЦР-диагностика: причины для проведения

Когда следует сдавать кровь на ПЦР? Чаще всего — при необходимости ранней проверки после риска заражения, когда организм еще не выработал антитела и серологические тесты (ИФА) могут быть ложноотрицательными.

ПЦР также выбирают по инициативе пациента, если нужно оперативно прояснить ситуацию после незащищенного полового контакта, контакта с биоматериалом, недавнего переливания крови и пр. В более поздние сроки, когда прошло достаточно времени для выработки антител, базовым методом служит ИФА.

Кому назначается ПЦР?

Определение инфекции ВИЧ при помощи ПЦР по рекомендации специалиста производят в следующих случаях:

• предварительное уточнение диагноза. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результат ИФА;
• иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг является дополнительным способом исследования ВИЧ. Оба метода применяются совместно, что позволяет исключить вероятность постановки ошибочного диагноза;
• при подтвержденном ВИЧ-статусе с помощью ПЦР отслеживают эффект от проведения выбранного лечения;
• для анализа крови доноров — для выявления наличия вирусного материала и/или антител к ВИЧ;
• для определения ВИЧ-статуса у новорожденного, когда мать имеет положительный результат. ПЦР в первые дни жизни позволяет заподозрить внутриутробное инфицирование или заражение младенца при прохождении по родовым путям. Тест проводится на 2 – 3 неделе после рождения.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где его можно сдать?

Анализ ПЦР на ВИЧ выполняют в специализированной лаборатории. Само исследование и его трактовка не занимают ни месяцев, ни недель. Забор крови длится до 6 минут, а готовый результат в большинстве случаев выдают в течение суток: первые 8 часов уходят на исследование, остальное время — на оформление. Забрать ответ можно уже на следующий день после взятия пробы. В некоторых центрах доступны ускоренные форматы, которые занимают около 2 часов.

Внимание! Полис ОМС дает возможность прохождения теста бесплатно в государственном учреждении здравоохранения.

Почти любая коммерческая лаборатория способна провести исследование, в том числе анонимно. Пациенту присваивают индивидуальный номер, к которому затем привязывают результаты; доступ к ним открывается в личном кабинете на сайте учреждения.

Сколько стоит сдать ПЦР-исследование?

Этот метод действительно дорогой: он требует современного оборудования и высокой квалификации специалистов.

Сколько стоит сдать анализ ПЦР на ВИЧ? В среднем — около 56–60 долларов, в зависимости от региона и лаборатории.

Проведение анализа

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ предусматривает:

• забор крови для исследования;
• при необходимости — дополнительный забор спермы у мужчин и половых выделений у женщин по показаниям.

Внимание! Тест позволяет определить вирусную нагрузку, что помогает врачам контролировать течение болезни и эффективность терапии.

Прочие особенности проведения этого анализа на ВИЧ, которые стоит принять во внимание:

• за пару дней до теста желательно снизить количество жирной пищи в рационе;
• кровь сдают натощак;
• к выделенным из образца нуклеиновым кислотам в реакционной смеси добавляют ферменты и реагенты, которые многократно копируют целевые участки генома вируса;
• анализ проходит в несколько циклов: число копий растет по геометрической прогрессии. Специальная программа сопоставляет полученные сигналы, чтобы идентифицировать ВИЧ.

Методы точной диагностики, к которым относится ПЦР, стоят дороже, но позволяют выявить ВИЧ на ранних сроках. А для лечения таких инфекций главное — своевременный и точный диагноз: он помогает продлить жизнь и улучшить ее качество.